Набор обнаружения антигена всей крови быстрый, набор теста антигена 150-250ul домашний

С медицинским инструментом IVD для того чтобы сделать нейтрализуя набор теста антитела SARS-CoV-2 быстрый

Нейтрализуя набор теста Fluerescent антитела & нейтрализуя тест антитела быстрый

Pseudovirus-нейтрализуя assay антитела был выполнен как описано выше (5). Кратко, клетки Vero были осеменены в 96 хороших плитах для произведения монослоя во время инфекции. Количество Pretitrated rVSV-SARS-Cov-2 [phCMV3-SARS-CoV-2 шип SARS-CoV-2-pseduotyped VSV-ΔG-GFP (зеленый дневной протеин) был произведен путем transfecting клетки HEK293T, ATCC CRL-3216] было инкубировано с серийно разбавленной человеческой плазмой на 37°C на 1 час перед добавлением к конфлюэнтным монослоям клетки Vero (ATCC CCL-81) в 96 хороших плитах. Клетки были инкубированы на 12 до 16 часа на 37°C в 5% CO2.Клетки после этого были зафиксированы в параформальдегиде 4%, были запятнаны с 1 μg/ml Hoechst, и были отображены используя imager CellInsight CX5 для того чтобы квантифицировать общее количество клеток выражая GFP. Инфекция была нормализована к среднему числу клеток зараженных с rVSV-SARS-CoV-2 инкубировала с нормальной человеческой плазмой. LOD было установлено как <1:20 on="" the="" basis="" of="" plasma="" samples="" from="" a="" series="" of="" unexposed="" control="" subjects=""> 50(титры медианной inhibitory концентрации) были высчитаны используя регрессию пригонки LogIC50 Одн-места в призме 8,0 GraphPad.

Assay обезвреживания высоко-объема основанный на флуоресцировани

Для того чтобы заполнить внутри зазор для serodiagnosis COVID-19 и оценки вакцины, мы начали основанный на флуоресцировани assay которому быстро и надежно измеряет обезвреживание репортера SARS-CoV-2 антителами от терпеливых образцов. Assay был построен на конюшне mNeonGreen (mNG) SARS-CoV-2 где ген mNG был проектирован на ORF7 вирусного генома (FIG. 1a)10. Полная последовательность mNG SARS-CoV-2 описана в дополнительном FIG. 1. Диаграмма 1B показывает схему технологического процесса assay обезвреживания репортера в хорошем формате 96. Протокол assay детализирован в дополнительных методах. Кратко, терпеливые сыворотки серийно были разбавлены и были инкубированы с вирусом репортера. После инкубации на 37°C для 1   h, клетки Vero CC-81 (пре-осемененные в хорошей плите 96) были заражены со смесями вируса/сыворотки на разносторонности инфекции (MOI) 0,5. На пост-инфекции h 16  , mNG-положительные клетки были quantitated используя читателя воображения высоко-содержания (FIG. 1B). Оно должен быть замечен что клетки Vero CC-81, не клетки Vero E6, были выбраны для mNG assay для того чтобы включить точную квантификацию дневных клеток. 60 образцов сыворотки COVID-19 от RT-PCR-подтверженных пациентов и 60 образцов сыворотки non-COVID-19 (помещенных в архив перед появлением COVID-19) были проанализированы используя вирус репортера. Для образцов некоторого COVID-19-positive, позитв дней пост-вирусный RT-PCR собрания образца был доступен и показан в таблице Table1.1. После инфекции репортера вирусной, клетки повернули зеленый цвет в отсутствии сыворотки (FIG. 1c, нижней панели); в отличие, инкубация вируса репортера с терпеливой сывороткой COVID-19 уменьшила число дневных клеток (верхней панели). Кривая доз-ответа была получена между числом дневных клеток и створкой разбавления сыворотки (FIG. 1d и дополнительного FIG. 2), который учитывало определение створки разбавления которая нейтрализовала 50% из дневных клеток (NT50). Assay репортера быстро диагностировал 120 образцов внутри 24   h: все 60 сывороток COVID-19 (образцы 1-60) показали положительный NT5035 к 5711, и всех 60 сывороток non-COVID-19 (образцы 61-120) показал отрицательный NT50 <20>1).

Параметр: